大奖娱乐官网ptpt9com:小鼠乳腺癌细胞,CCC-Ca761-03细胞

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 牌:ATCC
公司名称:上海素尔生物科技有限公司
  地:上海嘉定
发布时???:2015-12-04
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产品简介

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产品详细信息

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小鼠乳腺癌细胞,CCC-Ca761-03细胞 支原体污染的检测
荧光染色法观察:用荧光染料Hoechst33258,此染料能与DNA特异地结合,可使支原体内的DNA着色,然后用荧光显微镜观察。
染色方法为:用支持物盖片培养法将细胞接种在盖片上,在细胞汇合前(即未长满前)取出玻片,于碟皿中,用不含酚红的Hanks液漂洗,1:3醋酸钾固定10分钟,再用生理盐水漂洗后置于50μg/mL的Hoechst33258(生理盐水配制)中染色10分钟,置于蒸馏水漂洗1~2分钟,向细胞面滴加数滴pH5.5磷酸缓冲液,然后置荧光显微镜下观察。
若用细胞培养液,先离心去除上清液,再加入 Hanks液漂洗,离心弃上清后加入1:3醋酸甲醇固定10分钟,再用生理盐水漂洗后去上清液,再用Hoechst33258染色10分钟,加入蒸馏水漂洗,离心去上清蒸馏水,加3~5滴pH5.5磷酸缓冲液,稍吹打使沉淀细胞重悬浮,用吸管吸出,滴于载物片上,盖上盖片后观察。荧光显微镜下支原体呈绿色小点,散在于细胞周围或附于细胞表面。

电镜检测:若条件许可,可用扫描电镜或透射电镜观察。一般在细胞培养 48~72 小时,细胞接近汇合前,用胰酶消化细胞制成细胞悬液后进行。需经过固定、包埋、切片后才能进行观察。详细方法同细胞形态观察法。

供应:呼吸系统,循环系统,循环系统,泌尿系统,脑和神经系统骨、关节、肌肉、皮肤系统 ,内分泌系统等细胞。提供细胞染色、细胞耐药、细胞鉴定等一系列技术服务.

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小鼠乳腺癌细胞,CCC-Ca761-03细胞 现货复苏细胞如下:

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39529001-5MLK 050, Plain Dyed Polystyrene Microspheres, Green, 0,476-0,575μm, 10%, K 050

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39530001-50MLK 070, Plain Dyed Polystyrene Microspheres, Yellow, 0,576-0,740μm, 10%, K 070

39530001-5MLK 070, Plain Dyed Polystyrene Microspheres, Yellow, 0,576-0,740μm, 10%, K 070

39531001-10MLK 100, Plain Dyed Polystyrene Microspheres, Blue, 0,900-1,100μm, 10%, K 100

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收到小鼠乳腺癌细胞,CCC-Ca761-03细胞后,检查外包装是否完整,干冰是否完好,细胞冻存管是否完好且未溶解。如有破损、溶解等问题,请及时联系。细胞若不立即复苏,请将细胞置于液氮中保存。若复苏请进行以下操作.

175%酒精喷冻存管后,用干净的纸或酒精棉球擦拭冻存管,放入超净台。

2)预热细胞完全培养基,准备一根新的 15mL 无菌离心管和一个无菌的 T25 细胞培养瓶。

3)将 5ml 完全培养基添加到 T25 细胞培养瓶,备用。将 5ml 完全培养基添加到 15ml 离心管中,备用。

4)准备 37℃水浴,迅速取出细胞,将冻存管放入水浴中快速摇晃使之融化。

5)融化完全后的冻存管酒精棉球擦拭,在超净台中打开冻存管,用 1mL 移液器将细胞悬液取出,加入到准备好的含培养基的离心管中,混匀,放入离心机中, 1200rpm 离心3-5min

6)离心停止后取出离心管,小心地弃上清液,加入 1ml 完全培养基,轻吹打混匀成悬液,全部吸取转移到步骤 3 中准备的 T25 细胞培养瓶中,混匀后放置 37℃,5%CO2 培养箱培养。

7)次日于显微镜下观察细胞状态,视情况可换液或直接传代实验。

复苏细胞一般采用快速融化法,以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。

 

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